Hoechst 33342/PI雙染色法

1．懸浮生長的細(xì)胞在培養(yǎng)狀態(tài)下加入Heochst 33342，終濃度為1μg/ml；帖壁生長的細(xì)胞用含有0.02％EDTA的0.25％胰蛋白酶消化成單細(xì)胞懸液，離心，棄上清，用1ml全培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，加入Heochst 33342，終濃度為1μg/ml，37℃孵育7～10min。
2．4℃ 500～1000r/min離心棄去染液。
3．加入1.0ml PI染液，4℃避光染色15min。
4．400目的篩網(wǎng)過濾1次。
5．流式細(xì)胞儀分析。