SMART技術(shù)

在合成cDNA的反應(yīng)中事先加入的3'末端帶Oligo（dG）的SMART引物，由于逆轉(zhuǎn)錄酶以mRNA為模板合成cDNA，在到達(dá)mRNA的5'末端時(shí)碰到真核mRNA特有的“帽子結(jié)構(gòu)”，即甲基化的G時(shí)會(huì)連續(xù)在合成的cDNA末端加上幾個(gè)（dC），SMART引物的Oligo（dG）與合成cDNA末端突出的幾個(gè)C配對(duì)后形成cDNA的延伸模板，逆轉(zhuǎn)錄酶會(huì)自動(dòng)轉(zhuǎn)換模板，以SMART引物作為延伸模板繼續(xù)延伸cDNA單鏈直到引物的末端，這樣得到的所有cDNA單鏈的一端有含Oligo（dT）的起始引物序列，另一端有已知的SMART引物序列，合成第二鏈后可以利用通用引物進(jìn)行擴(kuò)增。由于有5'帽子結(jié)構(gòu)的mRNA才能利用這個(gè)反應(yīng)得到能擴(kuò)增的cDNA，因此擴(kuò)增得到的cDNA就是全長(zhǎng)cDNA。