如何確保單克隆穩轉細胞株在生產過程中的穩定性和產品質量
1.嚴格的篩選和鑒定：在細胞株投入生產之前，通過流式細胞儀、克隆形成實驗、PCR、Southern blot等技術對細胞進行嚴格的篩選和鑒定，確保所選細胞株的克隆性和目標基因的正確整合。
2.優化培養條件：為細胞提供最佳的生長條件，包括適宜的溫度、pH、氧氣和二氧化碳水平，以及營養充足的培養基。同時，定期更換培養基以避免代謝產物的積累影響細胞生長和產物表達。
3.質量控制：定期對細胞株進行質量控制檢測，包括細胞生長特性、基因表達穩定性、蛋白質產量和質量等，確保細胞株在長期培養過程中保持穩定。
4.避免基因突變和染色體異常：通過適當的細胞培養和管理策略，減少基因突變和染色體異常的風險，例如控制細胞的傳代次數，避免過度應激條件。
5.使用穩定的表達系統：選擇或設計穩定的表達系統，如使用強啟動子、增強子和穩定的轉錄元件，以及自我失活（SIN）或整合缺陷的載體，以提高基因表達的穩定性。
6.下游處理：優化下游純化過程，如離心、過濾、層析等，以確保最終產品的質量。去除宿主細胞蛋白、DNA和其他雜質對于提高產品的純度和安全性至關重要。
