什么是重組體的篩選

目的基因和載體重組并進(jìn)入宿主細(xì)胞后，由于操作失誤及不可預(yù)測(cè)因素的干擾等，并不能全部按照預(yù)先設(shè)計(jì)的方式重組和表達(dá)，真正獲得目的基因并能有效表達(dá)的克隆子只是其中的一小部分，絕大部分仍是原來(lái)的受體細(xì)胞，或者是不含目的基因的克隆子。為了從處理后的大量受體細(xì)胞中分離出真正的克隆子，目前已建立起一系列的篩選和鑒定方法。

重組體篩選的方法很多，歸納起來(lái)可分為兩種：在核酸水平或蛋白質(zhì)水平上篩選。從核酸水平篩選克隆子可以通過(guò)核酸雜交的方法。這類(lèi)方法根據(jù)DNA-DNA、DNA-RNA堿基配對(duì)的原理，以使用基因探針技術(shù)為核心，發(fā)展了原位雜交、Southen雜交、Northen 雜交等方法。從蛋白質(zhì)水平上篩選克隆子的方法主要有：檢測(cè)抗生素抗性及營(yíng)養(yǎng)缺陷型、觀測(cè)噬菌斑的形成、檢測(cè)目標(biāo)酶的活性、目標(biāo)蛋白的免疫特性和生物活性等。

無(wú)論采用哪一種篩選方法，最終目的都是要證實(shí)基因是否按照人們所要求的順序和方式正常存在于宿主細(xì)胞中。