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HT1080細胞的傳代經驗
發布日期:2023-07-21 09:34:04


HT1080細胞的傳代經驗


做好準備工作之后,先把舊的培養基倒掉。再用PBS洗兩遍,然后加0.05%胰酶/EDTA,劑量根據培養瓶大小定,一般是25cm 2 的瓶子大約0.8-1ml,輕搖10——15秒,使消化液均勻覆蓋瓶底即可,再倒掉。置培養箱3-5分鐘(看消化效果而定),等大部分細胞呈流沙狀滑落時,即加入培養基終止消化,一般以1:5左右的比例傳代(視計數結果和看細胞長滿的程度而定)。


這種方法養比較頑強的細胞很好,既節省步驟,也降低了離心和較長時間消化對細胞帶來的損傷,其實大家也可以試試用這種方法養別的細胞。


主要做的還是養骨髓基質干細胞(MSC),做好準備工作:


1、倒掉舊培養基;


2、PBS洗兩遍(如果能很容易就洗去雜質和懸浮的死細胞,洗一遍也可以);


3、加0.05%胰酶/EDTA,(劑量同上),置培養箱3分鐘(看效果而定),待大部分細胞呈流沙狀滑落時,加入一定量培養基(為了計數和按比例傳代操作方便)終止消化反應,輕吹勻幾次,吸取細胞懸液至15ml離心管(留一滴計數),1400rpm/10分鐘,棄懸液,加入一定量培養基,一般按1:3傳,大概每5天左右傳一次。


以上操作均應注意無菌。



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