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化學發光
發布日期：2025-12-17 16:58:23


化學發光



所謂化學發光，專業解釋為兩種或多種化學物質發生氧化還原反應，產生一個處于激發態的中間體，當這個中間體回到基態時釋放出光子，其發光能量來自于化學反應中釋放的能量，即化學能。這個過程分為兩種，直接發光和間接發光。

直接發光是最簡單的化學發光反應，其標記物（如吖啶酯）自身具有發光基團，在免疫反應后，僅需加入堿性溶液和過氧化氫等氧化劑，即可直接發生發光反應，無需催化劑。
（直接化學發光）

間接發光其標記物是酶（如ALP或HRP）。免疫反應后，加入相應的發光底物（如ALP對應AMPPD，HRP對應魯米諾），酶催化底物反應并產生光信號，又稱酶促化學發光。
（酶促化學發光）

在化學發光體系中，目前常用的直接發光標記物有魯米諾類和吖啶酯類，間接發光有辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（ALP），發光底物以魯米諾、AMPPD為代表。

此應用中最為普及的當屬與免疫相結合的分析檢測手段，行業內稱為化學發光免疫分析方法（CLIA），另外在科研實驗里，蛋白電泳轉印后通過ECL化學發光試劑盒檢測則是最為常用的。
Western Blot（蛋白免疫印跡）： 最經典的應用，用HRP標記的二抗與目標蛋白結合，加入化學發光底物后，HRP催化底物發光，通過曝光或化學發光成像來檢測蛋白條帶。