細胞給藥怎么給？

藥物濃度的精確控制對于實驗的成功至關重要。正確的細胞給藥不僅能夠確保實驗模型的準確性，還能有效評估藥物的效果。

精確計算藥物濃度

在準備藥物溶液時，需要特別注意以下幾點：

1. 確保藥物純度：使用高質量的藥物，并用精密儀器準確稱量。

2. 選擇合適的溶劑：例如，DMSO是一種常用的溶劑，但必須稀釋至1000倍以下，以避免對細胞產(chǎn)生毒性。

3. 促進藥物溶解：通過攪拌、振蕩或超聲等方法確保藥物充分溶解。

4. 稀釋至所需濃度：根據(jù)實驗需求，將藥物溶液稀釋至所需濃度，并進行過濾以去除可能的微生物污染。

5. 儲存條件：根據(jù)藥物的穩(wěn)定性要求，將其儲存在適宜的條件下，并在必要時檢測藥物濃度，確保其準確性。

如何給藥：

細胞給藥通常按照以下公式進行計算： 

細胞內藥物濃度=給藥濃度×細胞攝入率×細胞量/細胞體積

具體步驟

1. 藥物配制：

• 固體藥物配制：藥物質量(mg)=要達到的濃度(mM)×溶劑體積(L)×藥物的分子量

• 液體藥物配制：起始濃度=最終濃度×最終體積

2. 設置合適的給藥濃度：

• 查閱相關文獻，明確給藥濃度。

• 設置劑量梯度進行預實驗，通過兩次預實驗篩選出合適的藥物濃度。
  

3. 向培養(yǎng)細胞板內加入不同濃度藥物：

• 懸浮細胞先離心，貼壁細胞可直接吸走舊的培養(yǎng)基。

• 貼壁細胞需用PBS溶液進行清洗，蓋板后呈“8”字晃動，吸走PBS。

• 純白組無細胞，只加入培養(yǎng)基；對照組有細胞，加培養(yǎng)基不加藥；剩余8孔按照實驗設計加入不同濃度的藥物及培養(yǎng)基。

藥物配制過程中，還需嚴格遵循無菌操作規(guī)程，確保實驗的準確性。同時，要注意藥物的溶解性和穩(wěn)定性，選擇恰當?shù)娜軇┖蛢Υ鏃l件。所有操作都應按照實驗設計的要求嚴格執(zhí)行。