Hanks液的配制方法步驟及其注意事項(xiàng)
Hanks 液是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中極為常用的無機(jī)鹽溶液和平衡鹽溶液(Balanced Salt Solutions,簡稱 BSS)之一，簡稱HBSS。主要用途是用于配制培養(yǎng)液，稀釋劑以及細(xì)胞清洗液，但是不能單獨(dú)作為細(xì)胞/組織培養(yǎng)液。本詳細(xì)表述了Hanks 液平衡鹽溶液的配制方法和步驟。
原液A | ||
NaCl | 160g | |
MgSO4 ·7H2 O | 2g | |
KCl | 8g | |
Mg Cl2 ·6H2 O | 2g | |
CaCl2 | 2.8g | |
溶于1000ml雙蒸水 | ||
原液 B | ||
（1） | Na2 HPO4 ·12H2 O | 3.04g |
KH2 PO4 | 1.2g | |
葡萄糖 | 20.0g | |
溶于800ml雙蒸水 | ||
（2） | 0.4%酚紅溶液：取酚紅0.4g，置玻璃研缽中，逐滴加入0.1N NaOH，并研磨，直至完全溶解，約加0.1N NaOH 10ml。將溶解的酚紅吸入100ml量瓶中，用雙蒸水洗下研缽中殘留酚紅液，并入量瓶中，最后補(bǔ)加雙蒸水至100ml。 | |
將（1）液和（2）液混合，補(bǔ)加雙蒸水至1000ml，即為原液B。 | ||
應(yīng)用液 | ||
原液A | 1份 | |
原液B | 1份 | |
雙蒸水 | 18份 | |
混合后，分裝于200ml小瓶中，10磅高壓蒸氣滅菌15分鐘，臨用前用無菌的5.6% NaHCO3 調(diào)pH至7.2~7.6 | ||
注意事項(xiàng)：
酚紅對細(xì)胞有一定的毒性，可根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)選擇一定的量，酚紅所加的用量不一樣，溶液的顏色也會有少許變化。此外配制hanks液所用的試劑必須達(dá)到一級GR或者二級AR規(guī)格。
