核酸(DNA和RNA)的細胞核定位觀察

一、實驗目的
　　1 了解和學習兩類核酸顯示的原理及操作程序。
　　2 了解細胞中DNA和RNA的分布。

二、反應原理
1．Feulgen反應：
　　DNA經弱酸（1mol/L HCl）水解后，嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵被打開，并且使脫氧核糖與磷酸間的磷酯鍵斷開，在脫氧核糖的一端形成游離的醛基。醛基在原位與Schiff（無色品紅亞硫酸溶液）試劑結合，形成紫紅色化合物，使細胞內含有DNA的部位呈紫紅色陽性反應。

紫紅色的產生是因為反應產物的分子 內有醌基（醌基是一個具有顏色的發色團），所以凡含有DNA的部位，就呈紫紅色。而RNA用此法處理后則分解。反應式如下：
　　　
2．Unna染色法：
　　1899年Pappenheim 首創了甲基綠-哌洛寧（mehtyl-green-pyronim）染色法。1902年Unna對這一方法進行了改良。1940年Brachet研究證明用甲基綠—哌洛寧對DNA和RNA有選擇性的染色效果。堿性的甲基綠-哌洛寧混合染料處理細胞后，由于DNA、RNA對染料具有的親和力不同， 而使這兩種染料對兩類核酸具有了選擇性。 DNA被甲基綠染成綠色，RNA被哌洛寧染成紅色， 這樣就能使細胞中兩種核酸分布顯示出來。