酵母RNA的提取及含量測定（地衣酚顯色法）

一、實驗目的  
（1）熟悉酵母RNA的提取方法

（2）掌握地衣酚顯色法測定酵母RNA含量的原理和方法

二、實驗原理  
RNA與濃鹽酸共熱時，即發生降解，形成的核糖繼而轉變成糠醛，后者與3， 5-二羥甲苯反應呈鮮綠色，該反應需用三氯化鐵和氯化銅作催化劑，反應產物在670nm處有最大吸收。RNA在20－250微克范圍內，光吸收與RNA濃度 成正比。地衣酚反應特異性較差，凡是戊糖均有此反應。RNA和其他雜質也能給出類似的顏色。

三、試劑與器材
分析天平、恒溫水浴、分光光度計、沸水浴等。0.2％氫氧化鈉、乙酸、95％乙醇、乙醚、地衣酚試劑

四、操作方法
① 酵母RNA的提取

② RNA地衣酚法顯色測定

③ 數據處理及計算。

五、關鍵步驟與注意事項

該法反應特異性較差，凡是戊糖均有此反應。因此，測RNA含量時可先測定DNA的含量，再計算出RNA的含量.