甲醛滴定法測定氨基酸含量
一、目的
初步掌握甲醛滴定法測定氨基酸含量的原理和操作要點
二、原理
水溶液中的氨基酸為兼性離子，因而不能直接用堿滴定氨基酸的羧基。甲醛可與氨基酸上的—N+H3結合，形成—NH—CH 2 OH、—N(CH 2 —OH) 2 等羥甲基衍生物，使N+H3上的H+游離出來，這樣就可以用堿滴定N+H3放出H + ，測出氨基氮，從而計算氨基酸的含量。
若樣品中只含有單一的已知氨基酸，則可由此法滴定的結果算出氨基酸的含量。
若樣品中含有多種氨基酸（如蛋白質水解液），測不能由此法算出氨基酸的含量。
脯氨酸與甲醛作用后，生成的化合物不穩定，導致滴定后結果偏低；酪氨酸含酚基結構，導致滴定結果偏高。
三、材料、 試劑 與器具
（一） 試劑
1、0.5%酚酞酒精溶液
稱0.5g酚酞溶于100ml60%酒精中。
2、0.05%溴麝香草酚藍溶液
取0.05溴麝行草酚藍溶于100ml 20%乙醇溶液中。
3、1%甘氨酸溶液
取1g甘氨酸溶于100ml 蒸餾 水。
4、標準0.100mol/L 氫氧化鈉溶液
5、中性甲本醛溶液
取甲醛溶液50ml，加0.5%酚酞指示劑約3ml，滴加0.1mol/LnaOH溶液，使溶液呈微粉紅色，臨用前中和。
（二）實驗器具
1、錐形瓶
2、堿式滴定管
3、 移液管洗耳球
4、天平
5、容量瓶
6、試劑瓶
7、量筒
8、玻棒與燒杯
四、操作步驟
1、取3只100ml錐形瓶，按下表加入試劑。
2、混勻后用標準0.100mol/L氫氧化鈉溶液滴定至紫色（pH8.7~9.0）
3、結果計算
每毫升 氨基酸 溶液中含氨基氮的毫克數為
五、注意事項
利用甲醛滴淀法可以用來測定蛋白質的水解程度。隨著蛋白質水解度的增加，滴定值也增加，當蛋白質水解完成后，滴定值不再增加。
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