微生物檢驗中常見的半定量
在臨床微生物實驗室中,經常會用到半定量比如“+,++,+++,++++”,它既不像 “定性檢測” 只說 “有或無”,也不像 “定量檢測” 要具體精確到每毫升多少個細菌,但它也能幫助臨床醫生做出快速感染判斷、在用藥指導中發揮一定的作用,今天一起來了解下微生物檢驗中常見的“半定量“。
Part.1痰培養
痰培養由于標本粘稠且易受上呼吸道菌群污染,難以進行絕對定量。因此,實驗室常根據平板上的菌落分布和數量進行半定量檢驗,輔助判斷感染的嚴重程度。
依據平板上同一種菌在
四區劃線內的菌落數
判定如下:
| + (少見) | <10 | ||
| ++ (少量) | >10 | <5 | |
| +++ (中等) | >10 | >5 | <5 | 
| ++++ (多量) | >10 | >5 | >5 | 
合格痰標本中優勢菌常呈中度以上生長(+++)
或合格痰標本菌少量生長,
但與涂片鏡檢結果一致
(如肺炎鏈球菌,卡他莫拉菌等)。
革蘭染色(Gram stain) 是由丹麥醫生漢斯·克里斯蒂安·革蘭于1884年創立的一種細菌鑒別染色技術,是微生物學中最基礎、最重要的染色方法之一,快速區分G?和G?菌,為后續鑒定提供方向。
根據觀察到的菌數量
判定如下:
| 1+ | 少于1個 | 
| 2+ | 1~5個 | 
| 3+ | 6~30個 | 
| 4+ | >30個 | 
抗酸染色是一種主要用于檢測如結核分枝桿菌等含有大量脂質(如分枝菌酸)的抗酸菌染色方法。這類細菌因細胞壁結構致密,普通染色難以著色,而抗酸染色利用耐酸性強的染料(如石炭酸復紅),在加熱輔助下使染料滲入并牢固結合于細菌體內,使其呈現紅色。
根據觀察視野數量及菌條數
判定如下:
| 陰性 | 未查見抗酸桿菌/300個視野 | 
| 具體條數 | 1~8條/300個視野 | 
| 1+ | 3~9條/100個視野 | 
| 2+ | 1~9條/10個視野 | 
| 3+ | 1~9條/個視野 | 
| 4+ | ≥10條/個視野 | 
與抗酸染色不同,抗酸熒光染色利用金胺O等熒光染料對含有脂質細胞壁的細菌進行特異性染色,使菌體在熒光顯微鏡下呈現明亮的黃綠色熒光。
根據觀察視野數量及菌條數
判定如下:
| 陰性 | 未查見抗酸桿菌/50個視野 | 
| 具體條數 | 1~9條/50個視野 | 
| 1+ | 10~49條/50個視野 | 
| 2+ | 1~9條/個視野 | 
| 3+ | 10~99條/個視野 | 
| 4+ | ≥100條/個視野 | 
結核固體培養不僅能用于結核分枝桿菌的分離與確診,還可進一步開展菌種鑒定和藥物敏感性試驗。
判定如下:
| 陰性 | 斜面無菌落生長 | 
| 具體數 | 菌落生長<斜面1/4 | 
| 1+ | 菌落生長占斜面1/4 | 
| 2+ | 菌落生長占斜面1/2 | 
| 3+ | 菌落生長占斜面3/4 | 
| 4+ | 菌落生長布滿整個斜面 | 
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