酵母細(xì)胞的典型載體

（1）YIP載體

  YIP載體由大腸桿菌質(zhì)粒和酵母的DNA片段組成，可與受體或宿主的染色體DNA同源重組，整合進(jìn)入宿主染色體中，故只能以單拷貝方式存在，常用于遺傳分析。

（2）YRP載體

  YRP載體也由大腸桿菌質(zhì)粒和酵母的DNA片段組成，但酵母DNA片段不僅提供抗性基因篩選標(biāo)志，而且?guī)в薪湍傅淖灾鲝?fù)制順序（ARS）。由于大腸桿菌質(zhì)粒本身也有一個(gè)復(fù)制點(diǎn)，所以這類質(zhì)粒既可在大腸桿菌、又可在酵母中復(fù)制和表達(dá)，屬于大腸桿菌-酵母穿梭載體。

（3）YAC載體

  YAC載體是酵母人工染色體（yeast artificial chromosone）的縮寫，屬于能在酵母細(xì)胞中克隆大片段外源DNA的克隆體系，是由酵母染色體中分離出來的DNA復(fù)制起始序列、著絲點(diǎn)、端粒以及酵母選擇性標(biāo)記組成的能自我復(fù)制的線性克隆載體。

  實(shí)際上YAC載體以質(zhì)粒的形式出現(xiàn)，該質(zhì)粒的長度約11.4kb，帶有人工染色體所需的一切元件。如圖11.4.2所示，當(dāng)用它進(jìn)行克隆時(shí)，先用BamHI和SmaI對(duì)它進(jìn)行酶解，回收兩個(gè)臂，然后平末端的外源大片段DNA就可以同兩個(gè)臂連接，形成真正意義上的人工染色體。

  結(jié)果表明，每個(gè)YAC可以裝進(jìn)100萬堿基以上的大片段DNA，比柯斯質(zhì)粒的裝載能力還要大得多。YAC既可以保證基因結(jié)構(gòu)的完整性，又可以大大減少建立基因文庫所需的克隆數(shù)目，從而使文庫的操作難度減少。這種能組裝大片段DNA的質(zhì)粒對(duì)生物基因組計(jì)劃的實(shí)施具有重要的意義。